کیت HighCLIA βhCG-Total | آزمایش کمی لومینسانس هورمون بتا اچ‌سی‌جی تام

کیت HighCLIA βhCG-Total یک محصول پیشرفته برای آزمایش کمی لومینسانس بتا اچ‌سی‌جی تام (βhCG-Total) در نمونه سرم انسان است که با روش کمی‌لومینسانس (CLIA) طراحی شده و روی دستگاه HighCLIA120 اجرا می‌شود. این کیت با دقت، حساسیت و تکرارپذیری بالا، ابزاری استاندارد برای اندازه‌گیری βhCG در سرم، تشخیص و پایش بارداری و تشخیص تومورهای تروفوبلاستیک محسوب می‌شود.

هورمون بتا اچ‌سی‌جی (βhCG) چیست و چرا اندازه‌گیری آن اهمیت دارد؟

گنادوتروپین جفتی انسان (hCG) یک هورمون گلیکوپروتئینی است که از سلول‌های سینسیتیوتروفوبلاستیک جفت ترشح می‌گردد. این هورمون یک مولکول پیچیده است که از دو زیرواحد گلیکوپروتئینی متفاوت از نظر آنتی‌ژنی، یعنی آلفا و بتا تشکیل شده است.

زیرواحد آلفا غیر از hCG در دیگر هورمون‌های گلیکوپروتئینی مترشحه از هیپوفیز نیز یافت می‌شود (مانند LH، FSH و TSH). اما زیرواحد بتا به هورمون hCG اختصاص دارد، البته با هورمون LH شباهت قابل‌توجهی دارد. در مراحل اولیه بارداری، هم مولکول hCG و هم زیرواحدهای آزاد آن یافت می‌شوند. این کیت قابلیت شناسایی هر دو نوع فرم بتا (هم به صورت آزاد و هم در مولکول hCG) را دارد.

از نظر فیزیولوژیکی، ترشح hCG موجب حفظ جسم زرد گردیده و در نتیجه اجازه سنتز پروژسترون و استروژن‌هایی را می‌دهد که آندومتر را نگه می‌دارند. به طور کلی، با پیشرفت بارداری، جفت وظیفه تولید این هورمون‌ها را بر عهده می‌گیرد. سطح hCG به حداکثر غلظت افزایش یافته، سپس کاهش می‌یابد. عموماً hCG به شکل مولکول کامل در خون گردش می‌یابد. زیرواحدهای hCG مداوماً توسط کلیه شکسته شده و خارج می‌گردد.

کاربردهای بالینی اندازه‌گیری βhCG-Total

• تشخیص و پایش بارداری: از هفته اول بارداری تا زمان زایمان
• تشخیص حاملگی خارج از رحم: با بررسی روند تغییرات سطح هورمون
• پایش سقط جنین: کاهش سطح hCG نشان‌دهنده سقط ناقص یا کامل است
• تشخیص تومورهای تروفوبلاستیک: مانند مول هیداتیفورم و کوریوکارسینوما
• غربالگری قبل از تولد: به همراه سایر نشانگرها برای تشخیص سندرم داون و دیگر ناهنجاری‌های کروموزومی
• پایش پس از درمان تومور: بررسی عود یا پاسخ به درمان

اساس آزمایش کمی لومینسانس βhCG-Total

کیت HighCLIA βhCG-Total بر پایه ایمونواسی ساندویچی (Sandwich Immunoassay) طراحی شده است. در این روش، دو آنتی‌بادی مونوکلونال اختصاصی علیه دو اپی‌توپ متفاوت از βhCG-Total به کار می‌روند:

• آنتی‌بادی اول با آنزیم آلکالین فسفاتاز (ALP) کونژوگه شده است.
• آنتی‌بادی دوم با مولکول FITC کونژوگه شده است.
• میکروذرات مغناطیسی پوشیده‌شده با آنتی‌بادی ضد FITC، کمپلکس ایمنی را جداسازی می‌کنند.

پس از جداسازی مغناطیسی و شست‌وشو، سوبسترای کمی‌لومینسانس افزوده شده و نور تولیدشده توسط دستگاه HighCLIA120 اندازه‌گیری می‌شود. شدت نور رابطه مستقیم با غلظت βhCG-Total در نمونه سرم دارد و با استفاده از منحنی کالیبراسیون، مقدار دقیق آن محاسبه می‌شود.

مراحل انجام تست با کیت HighCLIA βhCG-Total

1. افزودن آنتی‌بادی‌های مونوکلونال ضد βhCG-Total به نمونه سرم
2. تشکیل کمپلکس ایمنی اختصاصی
3. افزودن میکروذرات مغناطیسی پوشیده‌شده با آنتی‌بادی ضد FITC
4. جداسازی مغناطیسی و شست‌وشو برای حذف مواد متصل نشده
5. افزودن سوبسترای کمی‌لومینسانس
6. اندازه‌گیری شدت نور توسط دستگاه HighCLIA120
7. محاسبه غلظت βhCG-Total با استفاده از منحنی کالیبراسیون

مشخصات فنی و محتویات کیت HighCLIA βhCG-Total

این کیت βhCG-Total به صورت Bottle-H های 100 تستی ارائه می‌گردد.

شرایط نگهداری کیت HighCLIA βhCG-Total

• نگهداری در دمای 2-8 درجه سانتی‌گراد و محافظت از نور
• خودداری از انجماد محصول
• قبل از استفاده Bottle-H را به حالت عمود درآورید
• پس از باز شدن سیل آلومینیومی، حداکثر 28 روز ماندگاری دارد
• فاقد مواد با منشاء انسانی
• بازه اندازه‌گیری: 1 تا 1000 mIU/mL
• ویال‌های کنترل و کالیبراتور را قبل از استفاده به مدت ۱۰ تا ۲۰ دقیقه با رولرمیکسر، میکس نمایید

مقادیر مرجع βhCG-Total در افراد سالم

• نتایج ممکن است بین آزمایشگاه‌ها به دلیل تفاوت در جمعیت و روش آزمایش متفاوت باشد. هر آزمایشگاه می‌بایست مقادیر مرجع نرمال اختصاصی خود را تعریف نماید.
• در تفسیر نتایج، وضعیت بالینی کلی بیمار، از جمله علائم بالینی، تاریخچه پزشکی و سایر داده‌های مرتبط باید مورد توجه قرار بگیرند.