کیت HighCLIA t-PSA | آزمایش کمی لومینسانس آنتی‌ژن اختصاصی پروستات تام

کیت HighCLIA t-PSA یک محصول پیشرفته برای آزمایش کمی لومینسانس آنتی‌ژن اختصاصی پروستات تام (t-PSA) در نمونه سرم انسان است که با روش کمی‌لومینسانس (CLIA) طراحی شده و روی دستگاه HighCLIA120 اجرا می‌شود. این کیت با دقت، حساسیت و تکرارپذیری بالا، ابزاری استاندارد برای اندازه‌گیری t-PSA در سرم و تشخیص اختلالات پروستات محسوب می‌شود.

آنتی‌ژن اختصاصی پروستات تام (t-PSA) چیست و چرا اندازه‌گیری آن اهمیت دارد؟

آنتی‌ژن اختصاصی پروستات (PSA) یک گلیکوپروتئین با وزن مولکولی 30000-34000 دالتون است و در دسته آنزیم‌های سرین پروتئاز قرار می‌گیرد. PSA توسط سلول‌های اپی‌تلیال پروستات به درون سمن ترشح گردیده و یکی از ترکیبات اصلی پلاسمای سمن است.

افزایش سطوح PSA در سرم معمولاً نشانگر اختلالات پاتولوژی مانند پروستاتیت، سرطان پروستات و هیپرپلازی خوش‌خیم پروستات (BPH) است. در زنان نیز PSA توسط غده پارااورترال، غدد آنال، بافت سینه و بافت سرطانی سینه ترشح می‌گردد، بنابراین می‌تواند به مقدار اندکی در سرم زنان یافت شود.

ترکیب PSA و مهارکننده‌های پروتئاز مانند α1-antichymotrypsin و α2-macroglobulin و برخی از پروتئین‌های مرحله حاد، در خون، کمپلکسی برگشت‌ناپذیر تشکیل می‌دهد و منجر به مهار فعالیت پروتئولیتیکی آنها می‌گردد. علاوه بر این، در حدود 30% از PSA موجود در گردش خون به شکل آزاد می‌باشد که فعالیت پروتئولیتیک ندارد (PSA-f).

کاربرد اصلی تست PSA برای بررسی کارآمدی یا پیشرفت بیماری در بیماران مبتلا به سرطان پروستات یا تحت هورمون‌درمانی می‌باشد. اگر سطح PSA پس از رادیوتراپی، هورمون‌درمانی یا جراحی به شدت افت کند، نمایانگر موفقیت‌آمیز بودن درمان است. در صورت وجود التهاب یا تروما در پروستات نیز ممکن است سطح PSA در مدت زمان و درجات مختلفی افزایش یابد.

از آنجا که PSA مهم‌ترین نشانگر تومور برای سرطان پروستات در نظر گرفته می‌شود، اندازه‌گیری مداوم غلظت PSA برای مانیتورینگ بیماران مبتلا به سرطان پروستات و ارزیابی اثربخش بودن درمان، از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است.

کاربردهای بالینی اندازه‌گیری t-PSA

• تشخیص و پایش سرطان پروستات (Prostate Cancer)
• تشخیص هیپرپلازی خوش‌خیم پروستات (BPH)
• تشخیص پروستاتیت (التهاب پروستات)
• پایش اثربخشی درمان پس از جراحی، رادیوتراپی و هورمون‌درمانی
• تشخیص عود تومور با افزایش سطح PSA

اساس آزمایش کمی لومینسانس t-PSA

کیت HighCLIA t-PSA بر پایه ایمونواسی ساندویچی (Sandwich Immunoassay) طراحی شده است. در این روش، دو آنتی‌بادی مونوکلونال اختصاصی علیه دو اپی‌توپ متفاوت از t-PSA به کار می‌روند:

• آنتی‌بادی اول با آنزیم آلکالین فسفاتاز (ALP) کونژوگه شده است.
• آنتی‌بادی دوم با مولکول FITC کونژوگه شده است.
• میکروذرات مغناطیسی پوشیده‌شده با آنتی‌بادی ضد FITC، کمپلکس ایمنی را جداسازی می‌کنند.

پس از جداسازی مغناطیسی و شست‌وشو، سوبسترای کمی‌لومینسانس افزوده شده و نور تولیدشده توسط دستگاه HighCLIA120 اندازه‌گیری می‌شود. شدت نور رابطه مستقیم با غلظت t-PSA در نمونه سرم دارد و با استفاده از منحنی کالیبراسیون، مقدار دقیق آن محاسبه می‌شود.

مراحل انجام تست با کیت HighCLIA t-PSA

1. افزودن آنتی‌بادی‌های مونوکلونال ضد t-PSA به نمونه سرم
2. تشکیل کمپلکس ایمنی اختصاصی
3. افزودن میکروذرات مغناطیسی پوشیده‌شده با آنتی‌بادی ضد FITC
4. جداسازی مغناطیسی و شست‌وشو برای حذف مواد متصل نشده
5. افزودن سوبسترای کمی‌لومینسانس
6. اندازه‌گیری شدت نور توسط دستگاه HighCLIA120
7. محاسبه غلظت t-PSA با استفاده از منحنی کالیبراسیون

مشخصات فنی و محتویات کیت HighCLIA t-PSA

این کیت t-PSA به صورت Bottle-H های 100 تستی ارائه می‌گردد.

شرایط نگهداری کیت HighCLIA t-PSA

• نگهداری در دمای 2-8 درجه سانتی‌گراد و محافظت از نور
• خودداری از انجماد محصول
• قبل از استفاده Bottle-H را به حالت عمود درآورید
• پس از باز شدن سیل آلومینیومی، حداکثر یک ماه ماندگاری دارد
• فاقد مواد با منشاء انسانی
• بازه اندازه‌گیری: 0.02 تا 280 ng/mL
• ویال‌های کنترل و کالیبراتور را قبل از استفاده به مدت ۱۰ تا ۱۵ دقیقه با رولرمیکسر، میکس نمایید

مقادیر مرجع t-PSA در افراد سالم

• نتایج ممکن است بین آزمایشگاه‌ها به دلیل تفاوت در جمعیت و روش آزمایش متفاوت باشد. هر آزمایشگاه می‌بایست مقادیر مرجع نرمال اختصاصی خود را تعریف نماید.
• در تفسیر نتایج، وضعیت بالینی کلی بیمار، از جمله علائم بالینی، تاریخچه پزشکی و سایر داده‌های مرتبط باید مورد توجه قرار بگیرند.