| تعداد تست | 50 preps |
|---|---|
| وضعیت مجوز | فاقد مجوز IVD |
| نوع نمونه | مایع آمنیوتیک |
| نوع بیماری / کاربرد | بیماریهای ژنتیکی, تحقیقات و پژوهش, سرطان, غربالگری پیش از تولد |
| روش استخراج | ستونی |
| هدف استخراج | DNA |
6000000 تومان
| نوع نمونه | از نمونه هایی با تعداد سلول پایین مانند مایع آمنیوتک و CSF |
| نوع اسید نوکلئیک | DNA ژنومیک با کیفیت و خلوص بالا جهت تست های ژنتیکی Array-CGH و Array-SNP |
| ویژگی های تخصصی | بدون نیاز به استفاده از فنول ، حذف کامل آلودگی ها و مهارکننده ها |
کیت استخراج ستونی BehPrep Amniotic Fluid DNA Extraction Kit با هدف خالصسازی DNA از نمونههای کمسلولی مانند مایع آمنیوتیک، مایع مغزی-نخاعی (CSF)، و سلولهای دهانی (Buccal Cells) با بازدهی بالا طراحی شده است. این کیت با دو روش ستونی و رسوبی برای استخراج DNA طراحی شده است تا حداکثر بازدهی ممکن از این نمونهها را که کم سلول هستند و در میزان مناسب غلظت برای انجام تستهای مولکولی چالش دارند، به دست آورد.
فرآیند استخراج در کیت استخراج DNA از مایع آمنیوتیک BehPrep به این صورت است که ابتدا با استفاده از بافر لایز قوی، سلولهای موجود در نمونه بهطور کامل تجزیه شده و DNA آنها آزاد میشود. سپس، با تنظیم شرایط بهینه برای اتصال DNA به ستون سیلیکایی، DNA به غشا متصل میگردد، در حالی که سایر اجزای سلولی و آلودگیها از ستون عبور کرده و حذف میشوند. پس از مرحله اتصال، دو مرحله شستشو با بافرهای مخصوص انجام میشود تا هرگونه آلودگی و نمکهای باقیمانده بهطور کامل از ستون حذف گردد. این بافرها نیاز به افزودن اتانول ندارند و باعث تسریع فرآیند میشوند.
در مرحله نهایی، DNA خالصشده با استفاده از بافر شستشوی نهایی (Elution Buffer) یا آب بدون DNase از ستون بازیابی میشود. DNA بهدست آمده با این روش دارای خلوص و کیفیت بالا و آماده برای استفاده در تستهای حساس مولکولی است. به طور کلی بازدهی DNA استخراج شده توسط این کیت استخراج DNA از 1-5mL نمونه µg 1-5 می باشد.
کاربردهای DNA استخراجشده شامل آزمایشهای توالییابی، array-CGH، array-SNP، PCR و دیگر تستهای مولکولی است. این DNA خالص به دلیل سطح بالای کیفیت، بدون مهارکنندههای PCR و با حداقل شکنندگی، برای تحقیقات ژنتیکی و تشخیصی در علوم مختلف بهویژه ژنتیک، اپیدمیولوژی و علوم زیستی بسیار مناسب است.
| تعداد تست | 50 preps |
|---|---|
| وضعیت مجوز | فاقد مجوز IVD |
| نوع نمونه | مایع آمنیوتیک |
| نوع بیماری / کاربرد | بیماریهای ژنتیکی, تحقیقات و پژوهش, سرطان, غربالگری پیش از تولد |
| روش استخراج | ستونی |
| هدف استخراج | DNA |
.فقط مشتریانی که این محصول را خریداری کرده اند و وارد سیستم شده اند میتوانند برای این محصول دیدگاه(نظر) ارسال کنند.
این کیت بهطور ویژه برای استخراج DNA از نمونههای کمسلول نظیر مایع آمنیوتیک (Amniotic Fluid)، مایع مغزینخاعی (CSF) و سلولهای دهانی (Buccal Cell) طراحی و بهینهسازی شده است و برای نمونههای مایع آمنیوتیک کشتدادهشده در حالت سوسپانسیون نیز قابل استفاده میباشد.
بازدهی استخراج DNA از ۱ تا ۵ میلیلیتر نمونه، به طور کلی معادل ۱ تا ۵ میکروگرم (µg) DNA میباشد. کیفیت DNA استخراجشده از خلوص بالایی برخوردار بوده و نسبت جذب A260/A280 آن در محدوده ۱.۸ تا ۱.۹ قرار میگیرد.
این کیت در سه سایز ۱۰، ۵۰ و ۱۰۰ واکنش ارائه میشود. محتویات آن شامل ستون اسپین (Spin Column)، لولههای کلکشن، بافرهای AF، PR، Binding، WB1، WB2 و EB، پروتئیناز K به همراه بافر PK میباشد. تمامی اجزا به جز پروتئیناز K آمادهی مصرف بوده و در دمای اتاق نگهداری میشوند.
ستونها و تمامی بافرها در دمای اتاق (۱۸ تا ۲۵ درجه سانتیگراد) تا پایان تاریخ انقضا پایدار هستند. تأکید میشود که نگهداری بافرها در یخچال (۲-۸ درجه) یا فریزر (۱۵- تا ۲۵- درجه) به دلیل تشکیل رسوب، تأثیر منفی بر عملکرد کیت خواهد داشت. پروتئیناز K پس از آمادهسازی باید در دمای ۲۰- درجه سانتیگراد نگهداری شود.
برای آمادهسازی پروتئیناز K، به ازای هر ویال ۴۰ میلیگرمی، مقدار ۲ میلیلیتر از بافر PK اضافه شده و به مدت ۲۰ ثانیه ورتکس میگردد. برای آمادهسازی بافر Binding، به ازای هر ۱۲ میلیلیتر بافر Binding، مقدار ۲۱ میلیلیتر اتانول ۹۶ یا ۱۰۰ درصد اضافه شده و پس از بستن درب، به خوبی مخلوط میشود.
بله، در روش ستونی، پس از مرحله اولین الوشن (Elution) با بافر EB، میتوان محلول الوشن جمعآوریشده را مجدداً بر روی همان ستون اضافه کرده و تحت شرایط یکسان (دمای ۶۰ درجه به مدت ۱۰ دقیقه و سپس سانتریفیوژ) مجدداً الوشن کرد که این عمل باعث افزایش میزان DNA بازیافتی میگردد.
حداکثر حجم نمونه قابل استفاده در هر بار استخراج، ۵ میلیلیتر است. چنانچه نمونه اولیه بیشتری در دسترس باشد، میتوان مرحله سانتریفیوژ و جمعآوری رسوب را تکرار کرد تا سلولهای بیشتری جمعآوری شده و بازده نهایی افزایش یابد.
دلایل اصلی کاهش غلظت شامل ناکافی بودن حجم نمونه اولیه، الیز نامناسب (کمبود زمان انکوباسیون یا ورتکس ناکافی)، عملکرد نامناسب پروتئیناز K (به دلیل نگهداری نامناسب) و عبور نکردن کامل محلول از ستون میباشد. راهکارهای پیشنهادی شامل استفاده از حجم نمونه بیشتر، افزایش زمان انکوباسیون تا ۱ ساعت در دمای ۵۶ درجه، اطمینان از نگهداری پروتئیناز K در دمای ۲۰- درجه و اعمال سانتریفیوژ با حداکثر سرعت میباشد.
DNA استخراجشده با این کیت از کیفیت و خلوص بالایی برخوردار بوده و کاملاً برای کاربردهای حساس مولکولی نظیر واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR)، Real-Time PCR، توالییابی (Sequencing) و آزمایشهای مبتنی بر آرایه مانند array-SNP و array-CGH مناسب میباشد.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.