| تعداد تست | 50 preps |
|---|---|
| وضعیت مجوز | فاقد مجوز IVD |
| نوع نمونه | بافت, باکتری, خون کامل |
| نوع بیماری / کاربرد | بیماریهای ژنتیکی, تحقیقات و پژوهش, سرطان |
| روش استخراج | ستونی |
| هدف استخراج | RNA |
6700000 تومان
| نوع نمونه | ﻧﻤﻮﻧﻪ خون ، بافی کوت ، مغز استخوان و PBMC ، رده های سلولی و سلول های کشت داده شده ، بافت ، باکتری های گرم مثبت و گرم منفی و غیره |
| نوع اسید نوکلئیک | Total RNA کوچک 50-200nt ﺑﺮ پاﻳﻪ TRIZOL |
| غلظت | 50-500 ng/μl |
کیت استخراج RNA شرکت به ژن با نام تجاری BehPrep TRI Total RNA جهت استخراج Total RNA در 30 دقیقه به روش ستونی از نمونه های مختلف طراحی و بهینه سازی شده است. RNA استخراج شده در این روش دارای خلوص بالا و کمترین میزان آلودگیهای پروتئینی، نمکی، و مهارکنندههای PCR میباشد.
این کیت جهت استخراج Total RNA برپایه غشای سیلیکایی و بافر Trizol از طیف گسترده ای از نمونه های بالینی و غیربالینی نظیر:
شما همچنین می توانید از محصولات مشابه هم بازدید فرمایید:
| تعداد تست | 50 preps |
|---|---|
| وضعیت مجوز | فاقد مجوز IVD |
| نوع نمونه | بافت, باکتری, خون کامل |
| نوع بیماری / کاربرد | بیماریهای ژنتیکی, تحقیقات و پژوهش, سرطان |
| روش استخراج | ستونی |
| هدف استخراج | RNA |
.فقط مشتریانی که این محصول را خریداری کرده اند و وارد سیستم شده اند میتوانند برای این محصول دیدگاه(نظر) ارسال کنند.
این کیت برای استخراج RNA توتال (Total RNA) از طیف گستردهای از نمونهها طراحی شده است که شامل خون محیطی، بافیکوت، بافت تازه (انسانی و حیوانی)، بافت تازه گیاهی، سلولهای کشتدادهشده تکلایه و سلولهای کشتدادهشده معلق میباشد.
RNA استخراجشده با این کیت دارای خلوص بالا و کمترین میزان آلودگیهای پروتئینی، نمکی و مهارکنندههای PCR میباشد. کیفیت مطلوب RNA با نسبت جذب A260/A280 بیشتر از ۱.۹ و نسبت A260/A230 بیشتر از ۱.۹ مشخص میگردد. همچنین بر روی ژلهای احیاکننده، باندهای 18S و 28S به صورت کامل قابل مشاهده بوده و نسبت 28S به 18S بیشتر از ۱ میباشد.
این کیت بر اساس روش فنل-کلروفرم (TRIzol-based) طراحی شده است. مزایای این روش عبارتند از:
خلوص بالاتر RNA و آلودگی DNA کمتر نسبت به کیتهای غیر فنلی
قابلیت استخراج RNAهای کوچک (کمتر از ۲۰۰ نوکلئوتید) نظیر miRNA
افزایش تصاعدی مقدار miRNA با افزایش حجم نمونه اولیه تا حد توصیهشده
عدم نیاز به انکوباسیون طولانیمدت
کیت: تمام محتویات کیت در صورت نگهداری در یخچال (دمای ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد) تا پایان تاریخ انقضا پایدار هستند. بافر Trizol حاوی ترکیبات فنولی بوده و باید در یخچال نگهداری شود.
نمونههای بافت تازه: جهت حفظ کیفیت RNA، میتوان آنها را در ازت مایع Snap Freeze نمود یا در دمای ۸۰- درجه سانتیگراد نگهداری کرد.
RNA استخراجشده: به مدت یک هفته در دمای ۲۰- درجه، یک ماه در دمای ۴۰- درجه و برای نگهداری طولانیمدت در دمای ۸۰- درجه سانتیگراد قابل نگهداری میباشد.
بافر RC به صورت ۱۰× در کیت ارائه شده است. برای تهیه بافر ۱×، به ازای هر ۱ میلیلیتر از بافر RC ۱۰×، مقدار ۹ میلیلیتر آب مقطر سترون اضافه میگردد. این بافر در مرحله لیز گلبولهای قرمز خون محیطی مورد استفاده قرار میگیرد.
خون محیطی: ۱ تا ۵ میلیلیتر
بافت تازه: ۲۰ تا ۱۰۰ میلیگرم
بافت گیاهی: ۱۰۰ تا ۳۰۰ میلیگرم
سلولهای کشتدادهشده: ۱ تا ۲۰ میلیون سلول
استفاده از حجم نمونه کمتر از مقدار توصیهشده باعث کاهش غلظت و کیفیت RNA میشود. استفاده از حجم بیشتر از مقدار توصیهشده نیز باعث افزایش تخریب RNA و کاهش کیفیت آن میگردد.
بله. کیتهای استخراج RNA بر پایه فنل-کلروفرم توانایی استخراج RNAهای کوچک (کمتر از ۲۰۰ نوکلئوتید) از جمله miRNA را دارند. همچنین افزایش میزان نمونه اولیه تا حد توصیهشده میتواند مقدار miRNA استخراجشده را به صورت تصاعدی افزایش دهد.
به دلیل خلوص بالای RNA و عدم آلودگی DNA در این روش، میزان ۵۰۰ نانوگرم تا ۱ میکروگرم از RNA استخراجشده جهت ساخت cDNA با کیفیت کافی میباشد. ساخت cDNA با مقادیر کمتر از ۵۰۰ نانوگرم نیز امکانپذیر است. توصیه میشود ساخت cDNA و سایر فرایندهای مولکولی بلافاصله پس از استخراج انجام شود.
استفاده از سانتریفیوژ یخچالدار (دمای ۴ درجه سانتیگراد) در مرحله جداسازی فازها پس از افزودن کلروفرم (مرحله ۷ فرایند) الزامی است. عدم استفاده از سانتریفیوژ یخچالدار در این مرحله باعث کاهش کیفیت استخراج شده و احتمال آلودگی RNA به ترکیبات فنولی و نمکی را افزایش میدهد.
دلایل اصلی کاهش کیفیت و غلظت و راهکارهای مربوطه عبارتند از:
کافی نبودن نمونه: استفاده از حجم نمونه بیشتر در محدوده توصیهشده
الیز نامناسب: رعایت زمان انکوباسیون ۵ دقیقه با بافر Trizol و مخلوط کردن کامل نمونه با ورتکس
تخریب RNA توسط RNase: استفاده از نمونه تازه، به حداقل رساندن آلودگی RNase محیطی، تمیز کردن محیط کار با اتانول ۷۰% و استفاده از وسایل RNase-free
آلودگی پروتئینی (نسبت A260/A280 پایین): استفاده از اتانول با خلوص بالا و رعایت کامل مراحل شستشو
آلودگی نمکی (نسبت A260/A230 پایین): رعایت دقیق مراحل شستشو با بافرهای RW1 و RW2 و خشککردن کامل ستون
نگهداری نمونه در شرایط نامناسب: خودداری از استفاده از نمونههای با چرخه انجماد-ذوب مکرر
مسدود شدن غشاء ستون: خودداری از استفاده از بافرهای دارای رسوب و رعایت تعداد سلول در محدوده توصیهشده
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.